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磁珠法提取试剂原理与尊龙凯时人生就博成分简介

来源:鲍启家 日期:2025-03-16

磁珠法核酸提取试剂盒的工作原理基于特定条件下对样本的快速裂解,利用磁珠颗粒对核酸的特异性吸附,经过洗涤和洗脱步骤,实现核酸的快速分离。这种提取方式效率高,性能稳定,所提取和纯化的核酸可以广泛应用于酶切、反转录、PCR、RI-PCR、Southern blot等多种常见的下游实验。磁珠法核酸提取试剂盒现已被广泛应用于多种生物样本中,如病毒核酸的提取、富集和纯化,其处理后的产品可用于临床体外检测。

磁珠法提取试剂原理与尊龙凯时人生就博成分简介

磁珠法提取试剂中的常见成分包括:

SDS(十二烷基硫酸钠)

SDS是一种阴离子表面活性剂,其性质如下:

  1. 对人体微毒,但作为优质发泡剂广泛应用于洗衣粉、牙膏和洗发水等。
  2. 在热水中易溶,尤其当温度超过70℃时,其溶解度增长不明显。
SDS的作用在于能破坏分子间的氢键,使蛋白质变性并实现核酸释放。

yi基苯基聚乙二醇(Nonidet P40)

NP-40是一种温和的非离子去垢剂,能有效破坏细胞膜,而对核膜的影响较小。

弱阳离子螯合树脂(Chelex-100)

该化学螯合树脂能够螯合多价金属离子,特别是对高价金属离子具有强亲和力。它在低离子强度、碱性及高温条件下使细胞膜破裂并引发蛋白质变性,随后通过离心去除Chelex颗粒,使结合物与DNA分离。需要注意的是,Chelex-100在模板中残留过多会影响PCR扩增效果。

蛋白酶K(Protein K)

蛋白酶K是一种强力蛋白分解酶,具有较高的比活性,是DNA提取过程中不可或缺的试剂。它主要通过酶解结合在DNA上的组蛋白,使DNA在溶液中游离。

聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)

曲拉通X-100作为非离子表面活性剂,其在水中稳定,不易受强电解质影响,能通过结合生物膜中的脂质形成可溶性复合物。

异硫氰酸胍(GITC)

GITC是一种强效的蛋白质变性剂,能够迅速破坏细胞结构,使核蛋白与核酸分离。这种成分也是经典RNA提取试剂TRIZOL的主要成分。

乙二胺四乙酸(EDTA)

EDTA是优良的钙、镁离子螯合剂,能抑制脱氧核糖核酸酶的降解作用,保障DNA的完整性。

Tris-HCl

Tris-HCl作为缓冲剂,在裂解液中提供了适宜的环境,保证核酸处理的有效性和稳定性。

总结来说,经典的裂解液通常包括去污剂(如SDS、Triton X-100、NP-40、Tween 20等)和盐(如Tris、EDTA、NaCl等),这些成分共同起到提高裂解效率、保护核酸结构的重要作用。

在生物医疗领域,使用尊龙凯时人生就博的核酸提取试剂盒,将大幅提高科研和临床实验的效率,为生命科学研究带来更多便利。

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