细胞功能 | 细胞周期检测解读及注意事项

细胞周期（Cell Cycle）是细胞由一次有丝分裂结束到下一次有丝分裂结束过程的总称。它在细胞的正常生长与分裂中发挥着关键作用，尤其在深入研究生物生长、发育及肿瘤控制等领域具有重要意义。尊龙凯时人生就博将为您解析细胞周期检测的原理、结果解读和实验注意事项，以帮助您更准确地分析细胞周期状态。

1. 细胞周期检测原理

细胞周期主要可分为分裂间期和有丝分裂期，其中分裂间期又细分为休眠期（G0期）、DNA合成前期（G1期）、DNA合成期（S期）和DNA合成后期（G2期）。

G0期：细胞处于静止状态，可以在适当刺激下重新进入细胞周期。

G1期：是细胞从有丝分裂到DNA复制前的一段时期，细胞在此阶段主要合成RNA和核糖体，并显著增大体积。

S期：即DNA复制期，此期间细胞除了合成DNA外，还生产组蛋白和DNA复制所需的酶。

G2期：为有丝分裂的准备期，DNA合成终止，并合成大量RNA，包括微管蛋白和促成熟因子等。

M期：细胞分裂期。

2. 结果解读及重要参数

- DipG1、DipG2、DipS：分别代表G0/G1期、G2/M期和S期在总细胞中的占比（G0/G1期时DNA含量为2N，S期为2N-4N，G2/M期为4N）。

- CV：变异系数，反映G0/G1峰的分辨率和精准度，是评估结果质量的重要参数，CV越小越好，CV小于5%的结果较优，一般小于10%均可被认可。

- RCS：反映所选模型与样本的拟合程度，通常在5以下为可接受范围。

- G2/G1：表示G2/M期与G0/G1期细胞DNA含量的比值，通常接近2，但并非严格的2，此数值与染色浓度有关，波动在此值附近是可以接受的。

- Debris：细胞碎片比例，Aggregates：黏连体比例，这两个比例越低，结果越好，建议尽量低于20%。

3. 实验注意事项

1. 确保获取足够的事件：在细胞收集及PBS清洗过程中可能导致部分细胞流失，建议每管细胞量在50万个左右，确保采集的有效细胞数量不低于10,000。
2. 单细胞悬液的制备要轻柔，以避免碎片的产生，过多碎片会影响S期的计算。
3. 先加PBS后加入无水乙醇固定，避免直接使用70%-80%乙醇以防细胞团聚和碎片生成。
4. RNA去除：使用PI等染料时需用RNase消除RNA干扰。
5. 排除黏连体：可用参数A、H和W排除与G2/M期重合的黏连体。
6. 采用低速收集细胞，流速越高，CV值相对越大，建议使用最低流速。
7. 荧光通道应设为线性（lin）放大。
8. 进行DNA染色后不要洗涤，以避免染料丢失和荧光强度下降。
9. 定期进行仪器质控，杜绝因机器设置引起的CV值变大。

尊龙凯时人生就博提供的细胞周期检测试剂盒是细胞研究的重要工具，掌握其原理、结果解读和实验注意事项有助于提高实验的准确性与可靠性。希望本文能为您提供实用的参考，更多细胞功能检测的内容，请持续关注尊龙凯时人生就博的专栏!